洁净室无菌环境监测与清洁简介

在洁净室环境中，微生物控制至关重要。受污染的环境可能导致产品召回，监管观察，罚款甚至消费者死亡。为了防止，破坏和监视洁净室中的微生物污染，必须了解洁净室微生物学的几个方面。这是无尘室微生物学文章系列的基础介绍，讨论了其中一些方面。第1部分和第2部分介绍了洁净室微生物学，讨论了指导文件和FDA的观察结果，并概述了洁净室中微生物污染的常见来源。第三部分提供了无尘室礼服程序的概述。后一篇文章将讨论环境监测的概念以及消毒剂功效和正确清洁以及洁净室检测的重要性。

环境监测

根据21 CFR 211.113（b）：“公司必须遵循旨在防止声称是无菌的药品受到微生物污染的适当书面程序。” 为了控制微生物污染，必须首先了解其来源。使用环境监视，公用事业监视和产品测试来了解这些来源。为了进行环境监测，对空气中的活菌和非活菌颗粒进行采样。此外，还对人员和表面进行了微生物污染取样。如果回收了微生物，则可以使用它们的识别来帮助识别潜在的污染源以及可能需要的任何纠正和预防措施。

监视环境和设施的趋势有助于确保防止污染的程序有效并且设施处于受控状态。其他好处包括：通过在超限事件发生之前识别出关注的区域，使设施变得积极主动；帮助建立相关的警报级别；帮助建立设施的主要微生物和居民区系清单；以及提供历史数据从而可以检测到数据异常。

重要的是要清楚定义“趋势”的外观。该定义应包括在程序中，以在整个机构内和一段时间内提供一致的解释。通常，趋势被理解为是历史数据的偏离或特定方向的偏离。1个警报级别应用作流程偏离其已建立控制状态的预警系统。在没有正当理由的情况下使用50％的行动水平在科学上是不合理的，在监管审核中可能会被反对。可以对趋势数据执行统计分析，以基于设施的过程能力建立警报极限。例如，可以利用历史数据并建立95％的置信区间，其中95％的采样将被预期在建议的警报范围内。

大多数预期行动级别已在多个监管文件中确定。如果监管机构未规定行动限值，例如，穿着工作服的人员（戴手套的人除外），则风险评估和统计分析可为建立行动限值提供依据。

污染恢复率在USP <1116>中进行了描述。它是用于趋势分析结果的有用工具，该结果通常包含零菌落形成单位（CFU），例如在无菌过程环境监测中。USP <1116>指出：“由于微生物采样方法的固有变异性，与着眼于从给定样品中回收的菌落数量相比，污染物的回收率是趋势结果更有用的度量。” 2污染回收率的计算方法是：将含有任何种类生长物的培养皿总数除以培养皿总数乘以100，得出一个百分比。USP <1116>还提供了有关无菌环境中建议的初始污染回收率的表格。

消毒功效和正确清洁的重要性

控制污染物进入洁净室是整个清洁和消毒过程中关键的问题。3转移到清洁区域的组件，人员，推车，储罐，工具和仪器的清洁度至关重要。如果未对这些物品进行适当的消毒或清洁，或人员的穿着不当，则微生物很容易被运送到洁净室。提供了讨论消毒剂功效测试的多个指导文件和文章。两个非常好的来源包括USP <1072>和PDA技术报告70。

必须先清洁物品，然后才能进行消毒或灭菌。清洁是从物体上清除异物的过程，并且消毒剂必须按预期工作。未清除的异物可能会阻止消毒剂与表面的微生物接触。异物也可能与消毒剂产生负面反应并使它们失活。

难以清洁的区域受21 CFR 211.42约束。该法规要求光滑，坚硬的表面易于清洁。多孔表面会藏有微生物，使其难以回收用于环境监测。多孔表面还会使清洁和消毒过程中的微生物难以破坏。3难以触及的表面可能会导致无法正确清洁的危险。

匆忙进行清洁，草率清洁或处理不当是危险的做法。更糟糕的是*跳过清洁过程。留下的污垢，油污，指纹和消毒剂残留物会为微生物创造好客的栖息地，甚至保护潜在的微生物免受消毒剂的侵害。3遵循SOP并正确清洁以清除污物源是非常重要的，即使肉眼看不到它们也是如此。这将有助于确保消毒剂可以正常工作。

在消毒剂功效研究期间确定适当的消毒剂浓度。如果没有正确准备，处理或使用消毒剂，则破坏微生物的效果可能会受到影响。3这可能导致微生物的生存。如果不正确使用和使用消毒剂，其有效性可能会受到影响。例如，缩短已建立的消毒剂接触时间可以导致微生物存活。3即使正确配制并经常更换消毒剂溶液，肮脏的设备（例如拖把头或水桶）也会影响消毒剂的有效性并导致微生物存活。3污染物可能会在不知不觉中散布到整个设施中。确保清洁设备的清洁和正确维护也很重要。

消毒剂必须符合在设施中使用的资格。在对消毒剂进行鉴定时，测试应包括工厂中发现的各种表面，这些表面代表坏的孔隙率和难清洁的表面。如果可能，选择用于研究的微生物应包括从设施中分离出来的环境。在研究过程中，还将确定建议的联系时间。术语“接触时间”是指消毒剂保持湿润并与被消毒表面接触的时间。

应该在整个使用期间评估消毒剂的性能，以确定使用到期日。PDA技术报告70建议使用接近或稍微超过研究有效期的消毒剂。重要的是要注意，在使用A / B级之前，应对消毒剂进行无菌过滤或消毒，以防止消毒剂成为可扩散到整个洁净室的污染源。

消毒功效测试和消毒程​​序通常是监管审核中的热门话题。为使流程顺利进行，请做好准备，并以干净的报告形式将所有数据汇总并整齐地组织起来。

结论

洁净室微生物学涉及许多学科。可以参考洁净室微生物学概念的多种指导文件和法规。为避免潜在的监管发现，请积极主动并在线发布研究警告信，并尽快纠正任何指出的程序空白。

为了控制微生物污染，必须控制无尘室中发生的所有活动，包括过程，程序，人员，原材料，赋形剂，组件，API，设施，设备，机器，环境，表面，空气供应，公用事业，水来源，材料转移，相邻区域以及消毒和清洁方案。员工每次处理无菌产品时，必须遵循程序，使用适当的无菌技术，注意细节并格外小心。消费者的生活可能取决于员工的行为，其品行，正确控制的洁净室以及洁净室微生物学原理。